说说快速转膜液的操作步骤

　　快速转膜液是一种粉末形态的安全无毒的用于湿法快速转膜的缓冲液。使用本快速转膜液时，在400mA恒流转膜约20-25分钟即可将聚丙烯酰胺凝胶上的蛋白转移至PVDF膜或硝酸纤维素膜(NC膜)等印迹膜上，并且产热少，转膜效果好。而相同的条件下使用传统的转膜液需要转膜更长时间。本产品为预混粉末安全无毒害，使用前需要用水和乙醇配制，但无需调节pH值。本产品不含有毒有害组分，也无需使用剧毒的甲醇等试剂。
 

　　

　　下面说说快速转膜液的操作步骤：

　　

　　1、1X快速转膜液的配制（1000ml）：取50ml快速转膜液（20X）+850ml去离子水+100ml无水乙醇2：做好转印三明治结构，然后转移至电泳槽中，设定恒流400mA，电泳时间25-30分钟完成蛋白转膜。注意：PVDF膜使用前要用无水甲醇润湿30秒以上。

　　

　　2、转印电流建议设定恒流400mA,一般25-30分钟可以将150kD以下蛋白全转印；小于100kD蛋白20分钟即可全转印；对于大于150kD蛋白，建议延长5-10分钟。

　　

　　3、凝胶的浓度影响转印的效率，对于胶浓度7.5%,20分钟即可完成转印；对于胶浓度10%,25-30分钟即可完成转印；对于胶浓度大于10%,建议延长5-10分钟

　　

　　4、40分钟时间内转膜不需要放冰上，转膜槽内外都不可放冰预冷，否则会影响效率。

　　

　　本快速转膜液产热少，外槽无须冰浴，仅用转膜槽中的内置冰盒进行降温即可。本快速转膜液使用便捷，无需调节pH值。本产品适合手工配制的Tris-Gly和Hepes等缓冲系统的SDS-PAGE凝胶的转膜，也适合Tris-Gly、Hepes和Bis-Tris系统等预制胶的转膜。使用后转膜液可以回收，回收后可以再使用1-2次。